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generale: Qual è il minimo d’ordine?

Il minimo d’ordine è di € 400,00

GENERALE: A quanto ammontano le spese di spedizione?

Per spedizioni a temperatura ambiente o 4°C le spese di spedizione sono pari a 20.00 € , per spedizioni in ghiaccio secco le spese di spedizione sono pari a 25.00 €

GENERALE: Sulla scheda tecnica del prodotto che mi è stato consegnato è indicato < conservare a -20°C > ma il pacco mi è stato spedito a 4°C con i panetti di ghiaccio. Come mai?

La spedizione dei prodotti viene effettuata seguendo le indicazioni dei fornitori che permette di mantenere il prodotto nel miglior modo possibile; la spedizione a 4°C mantiene un buono stato dei prodotti ed evita un ciclo di congelamento/scongelamento.

PROTEOMICA: Come posso scegliere correttamente un anticorpo secondario?

la selezione nell’anticorpo secondario dipende dall’anticorpo primario che si sta utilizzando. L’anticorpo secondario dovrebbe riconoscere la specie ospite nel quale è stato prodotto l’anticorpo primario. Ad esempio se l’anticorpo primario è un < mouse monoclonal> è necessario che il secondario sia un anti mouse

PROTEOMICA: Qual è la temperatura di conservazione dei campioni proteici? (siero, plasma, sovranatanti di coltura)

-80°C se possibile, alternativamente -20°C. Ti suggeriamo di suddividere i campioni in aliquote al momento del congelamento, di congelare immediatamente e di evitare cicli di congelamento/ scongelamento.

PROTEOMICA: Come devo conservare l’anticorpo ricevuto?

Accorre seguire le indicazioni di conservazione riportate sulla scheda tecnica.

PROTEOMICA: Come posso ridurre il background di un ELISA?

Ci sono deversi elementi che possono determinare un innalzamento del background: blocking non sufficiente ( nel caso di ELISA “ home made” ), periodo di incubazione e sviluppo eccessivo, lavaggi non sufficientemente stringenti o energici. Ti suggeriamo di verificare questi punti.

PROTEOMICA: Come vanno analizzati i risultati di un test ELISA?

La miglior equazione è quella 4PL o 4 Parametric Logistic, che descrive una funzione asimmetrica che meglio si adatta allo sviluppo delle densità ottiche/di fluorescenza o di chemiluminescenza

PROTEOMICA: Un EIA è identico ad un ELISA?

Fino a qualche anno fa i due termini identificavano una reazione enzimatica competitiva ( EIA ) o diretta ( ELISA ); ora sono utilizzati come sinonimi.

PROTEOMICA: Quanti campioni è possibile misurare con un ELISA?

Attorno a 40 in duplicato

GENOMICA: Come va risospeso un oligo?

Ti raccomandiamo di risospendere l’oligo come stock concentrato in TE (10 mM Tris pH 8.0, 0.1 mM EDTA). Alternativamente è possibile utilizzare H2O sterile.La concentrazione stock che suggeriamo è 100uM. Per risospendere un oligo a questa concentrazione, aggiungere un volume di TE ( in ul ) equivalente a 10 volte il numero di nanomoli di DNA presenti nel tubo.

GENOMICA: Occorre vortexare l’oligo prima di risospenderlo?

Ti raccomandiamo di centrifugare brevemente il tubo contenente l’oligo prima di aprirlo in modo da assicurarti che il pellet sia sul fondo del tubo e non si perda una volta che il tubo viene aperto. Dopo aver aggiunto il TE, occorre vortexare rapidamente il tubo, ma non ti suggeriamo di centrifugarlo una volta che l’oligo è risospeso.

GENOMICA: In quanto tempo posso ricevere i miei oligo?

Una volta che l’ordine < on line> è approvato, le sequenze vengono mandate in produzione. Riceverai gli oligo di scala 25nmoli, standard desalting, in 2-3 giorni

GENOMICA: Come posso ricercare il clone cDNA di mio interesse?

Il modo migliore inserire l’ NCBI reference accession number relativo all’mRNA del trascritto ( es NM_000123) nel motore di ricerca:

GENOMICA: E' possibile avere la ORF di mio interesse clonata in un vettore diverso da quello proposto in catalogo da Origene?

Si, esiste un servizio di custom subcloning, grazie al quale, previa verifica, la ORF di interesse può essere subclonata in un vettore a scelta, fra tutti quelli disponibili nel catalogo Origene.

GENOMICA: Quale plasmide Origene è consigliato per le trasfezioni stabili?

Origene consiglia il vettore PCMV6NEO http://www.origene.com/cdna/search-all.mspx?term=pcmv6-neo&product=ALL

GENOMICA: Che metodo raccomandate per verificare l’efficienza di silenziamento dei costrutti gene-specifici shRNA o siRNA?

La qPCR è una diretta verifica dell’abbattimento del messaggero; il western blot permette di confermare la ridotta sintesi della corrispondente proteina.

BIOLOGIA CELLULARE: Che cos’è il BME e come funziona?

Il BME ( Basement Membrane Extract )deriva dal Sarcoma murino Engelbreth-Holm-Swarm (EHS). E’ composto da proteine solubili della membrana basale. I maggiori componenti sono Laminina I, Collagene IV, Entactin, Proteoglicani Eparan Solfato. Il BME può essere utilizzato per il mantenimento del fenotipo differenziato in una varietà di tipi cellulari. La matrice può essere utilizzata anche in test di invasività.

BIOLOGIA CELLULARE: Cosa sono le culture 3-D?

Le colture 3-D sono colture “ in vitro” dove le linee cellulari immortalizzate, le linee primarie, le cellule staminali o gli espianti, sono inglobati in una matrice con le caratteristiche dell’ambiente “ in vivo”.

BIOLOGIA CELLULARE: Che cos’è la migrazione?

La migrazione cellulare è il movimento delle cellule in risposta ad uno stimolo chimico. La linea Cultrex Cell Migration Assays permette di valutare la migrazione basata sulla capacità delle cellule di attraversare un setto poroso ( pori 8 micron ), in risposta ad un gradiente chemiotattico (Cat# 3465-024-K & 3465-096-K).

BIOLOGIA CELLULARE: Che cos’è l’invasività?

L’invasività cellulare è la migrazione attraverso una barriera fisiologica in risposta ad una sostanza chemiotattica. In questo caso la membrana porosa è rivestita da un film di matrici proteiche extracellulari. Le cellule attraversano questa barriera grazie ad una combinazione di degradazione della membrana e movimento cellulare . (Cat# 3455-024-K, 3455-096-K, 3456-024-K, 3456-096-K, 3457-024-K, 3457-096-K, 3458-024-K, 3458-096-K, 3460-096-K.

BIOLOGIA CELLULARE: La densità cellulare ( % confluenza ) e il numero di passaggi, sono fattori importanti durante la transfezione?

Sì.Una densità ottimale, 50-70% di confluenza al momento della transfezione, è essenziale per il successo della transfezione con TransIT-LT1, nella maggior parte dei tipi cellulari. Ti suggeriamo di controllare le indicazioni riportate sul protocollo. Il monitoraggio del numero dei passaggi è importante poiché un numero elevato di passaggi può alterare le caratteristiche delle cellule come la morfologia o la divisione cellulare

BIOLOGIA CELLULARE: Quanto DNA è necessario nelle reazioni di elettroporazione?

Ti suggeriamo di utilizzare una concentrazione finale di 20ug DNA/ml di volume di elettroporazione. Se si utilizzano le cuvette 0,2 cm, ti raccomandiamo di utilizzare 2ug di DNA nella sospensione cellulare Ingenio. Se si utilizzano cuvette 0.4 cm, ti raccomandiamo di utilizzare 4ug di DNA nella sospensione cellulare Ingenio.

VETERINARIA: Come identifico se posso utilizzare un saggio su specie di interesse veterinario?

Per alcuni fattori specie-specifici nel protocollo viene riportata la specie di utilizzo. Ci sono però fattori ( SOD, NO, ormoni etc ect ) che non sono specie specifici perciò i saggi proposti possono essere utilizzari su campioni umani, e anche su specie di interesse veterinario. In diversi casi viene riportata l’indicazione < MultiSpecies > oppure non viene specificata alcuna specie.